DESCRIPCIÓN

Se ha desarrollado un procedimiento que permite la cuantificación selectiva y diferencial de cuatro especies de bacterias lácticas (S. thermophilus, L. bulgaricus, L. casei, L. acidophilus) y de B. lactis en cultivos mixtos presentes en leches fermentadas. La novedad del procedimiento y lo que le aventaja respecto de los existentes es que puede distinguir simultáneamente tres especies diferentes de lactobacilos entre sí y frente a otra bacteria láctica como S. thermophilus y a bifidobacterias, todo ello basado en el empleo de diferentes condiciones de incubación y/o en la diferenciación por morfología de las colonias, pero sin adición de antibióticos a los medios de cultivo que pudieran comprometer la viabilidad de las especies en estudio.

El procedimiento se basa en el empleo de características selectivas de crecimiento. El crecimiento diferencial se ha basado en el empleo selectivo de las fuentes de carbono, en las diferentes temperaturas, atmósferas y tiempos de incubación. A la especificidad de medio se ha unido diferenciación morfológica de las colonias obtenidas. En ningún caso se utilizan antibióticos como agentes selectivos de crecimiento. Los medios de cultivo basales utilizados han sido descritos en la Norma Oficial de Análisis de las bacterias del yogur [ISO/FDIS 9232|IDF146:2002].

La principal aplicación industrial del procedimiento desarrollado es el análisis microbiológico cuantitativo de diferentes especies de bacterias lácticas y bifidobacterias tanto en yogures como en leches fermentadas que contengan cultivos mixtos de estas bacterias, con el objeto de determinar los niveles de viabilidad en el producto que respondan, por un lado, a los valores requeridos por la legislación para las bacterias del yogur y, por otro lado, a los recomendados para las bacterias probióticas. La validación del procedimiento se ha realizado en base al estudio de la selectividad de los medios, la exactitud y precisión para recuperar la población ensayada, la reproducibilidad del procedimiento y el análisis de la posible competencia entre las especies. También se ha analizado el efecto matricial mediante la cuantificación de las poblaciones en leche acidificada en comparación con los medios de cultivo de referencia.Para la validación del procedimiento de cuantificación de cada especie se han seguido recomendaciones de la Norma ISO/TR 13843:2000.

La verificación de la identidad de las especies se realizó mediante identificación de un 10% de colonias obtenidas en los diferentes medios selectivos y diferenciales según el procedimiento que se describe en la patente: Procedimiento para la detección e identificación específicas de bacterias lácticas y bifidobacterias en leches fermentadas mediante PCR –DGGE.

ASPECTOS INNOVADORES

La principal característica de esta innovación es el uso de medios y condiciones de cultivo específicas de bacterias lácticas y bifidobacterias

VENTAJAS COMPETITIVAS

La principal ventaja de la invención es el uso de medios específicos y condiciones de incubación dando como resultado una morfología determinada y usándolo como marcadores de bacterias lácticas permitiendo la identificación y cuantificación de manera rápida, simple, con una elevada especifidad y sin el uso de ninguna técnica sofisticada.

PALABRAS CLAVE

Lactobacilos, cuantificación, bifidobacterias, identificación, leches fermentadas, yogur, probióticos

SOLICITUD DE PATENTE

200601789, solicitada a 03-07-2006

PERSONA DE CONTACTO

Estrella Maroto
mail: e.maroto@orgc.csic.es
teléfono: +34 91 585 52 51

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